HPLC（高效液相色譜）是一種常用的分析技術(shù)，被廣泛應用于化學、生物、醫(yī)藥等領(lǐng)域。色譜柱是HPLC系統(tǒng)中的核心部件，通常由填料材料和柱壁組成。填料材料可以是各種各樣的，比如疏水相和親水相。而柱壁則是填料與流動相之間的隔離層，它能夠保護填料的結(jié)構(gòu)，同時也能影響分離效果。

 

影響色譜柱性能的物理參數(shù)有哪些？

 

(1) 硅膠純度

 

硅膠純度和殘留金屬離子濃度，硅膠的雜質(zhì)會影響化合物的峰形，硅膠表面的金屬含量高會影響堿性化合物的峰形，易發(fā)生拖尾。

 

(2) 色譜柱尺寸

 

填料床的長度和內(nèi)徑，增加色譜柱長度，可以在一定程度上提高柱效，但也會升高壓力和導致峰展寬；寬柱徑，提高載樣量，但也會增加橫向擴散，同樣會導致峰展寬。窄柱徑可以節(jié)約溶劑，可減少橫向擴散，但壓力較大，對系統(tǒng)要求較高。

 

(3) 顆粒形狀及粒徑

 

球形顆粒柱效高、重現(xiàn)性好、柱床結(jié)構(gòu)均勻，不規(guī)則形柱床結(jié)構(gòu)不均勻、流動相線速度不均勻，容易譜帶展寬；平均顆粒直徑，粒徑越小，柱效越高，柱壓也越高。粒徑分布越廣則柱效越低，壓力越大。

 

(4) 顆粒表面積

 

顆粒外表面和內(nèi)部孔表面的總和，以m2/g表示，相對而言高表面積對樣品具有較強的保留能力，更大的柱容量和分離度。而低表面積能更快達到平衡狀態(tài)，更適合梯度洗脫程序。

 

(5) 孔徑

 

顆粒的孔或腔的平均尺寸，范圍是80~300Å，大孔徑的填料顆粒可以延長大分子溶質(zhì)在填料表面的滯留時間，改善分離，所以大孔徑填料適合分離大分子化合物或者水動力體積較大的分子。